|
چکیده
|
اندوفیت ها میکروارگانیسم هایی شامل باکتری ها،قارچ ها یا اکتینومیست ها هستند که با داشتن تعاملات پیچیده ای شامل ارتباط هم زیستی متقابل و آنتاگونیسمی،بصورت درون سلولی یا بین سلولی در بافت های گیاهی زندگی می کنند و به عنوان اجزای ضروری شبکه میکروبی گیاهی هستند. (Tiwari p et al,2022) اکتینوباکتری ها،باکتری های رشته ای و گرم مثبت اند که از نظر اقتصادی و زیست فناوری ارزشمندترین پروکاریوت ها محسوب می شوند.این میکروارگانیسم ها قادر به تولید طیف گسترده ای از ترکیبات فعال زیستی مانند عوامل ضدتومور،عوامل سرکوب کننده ایمنی،آنزیم ها و آنتی بیوتیک ها هستند.( Jabery M al,2016) ( Sapkota A et al,2020) این مطالعه شامل جداسازی،شناسایی و بررسی فعالیت آنتی بیوتیکی اکتینوباکتریای جدا شده از گیاه دارویی پونه کوهی است. برای بررسی خاصیت آنتی بیوتیکی ،جدایه ها در برابر باکتری های پاتوژن استافیلوکوکوس به اورئوس مقاوم و حساس دارو، اسینتوباکتر بومانی، کلبسیلاپنومونیه حساس و مقاوم به دارو و سودوموناس اروجینوزا حساس و مقاوم به دارو قرار داده شدند. و در نهایت جدایه ها از نظر دارا بودن زن های PKSI و PKSII و NRPS مورد سنجش قرار گرفتند. نمونه های متعددی از گیاه پونه از مناطق مختلف استان ایلام جمع آوری و پس از زدوده شدن آلودگی ها ، بعد از چند مرحله ضدعفونی کردن در هیپوکلریت سدیم و الکل 70 درصد و آب مقطر استریل، نواحی ذکر شده به قطعات 3-2 میلیمتری خرد شدند و جهت جداسازی جدایه های اکتینوباکتریا در محیطکشت های استارچ کازئین آگار حاوی دی کرومات پتاسیم و سیکلوهگزاماید و R2A کشت داده شدند. با استفاده از روش تشخیص مولکولی باکتری های جداسازی شده از نظرژنوتیپی مورد بررسی قرار گرفته شدند . در نتیجه 54 باکتری از قسمتهای مختلف گیاه پونه جداسازی شد، از برگ تعداد 15 باکتری(77/27درصد)، از ریشه تعداد 17 باکتری(48/31درصد) و از ساقه تعداد 22 باکتری(74/40 درصد) به دست آمد.نتایج آنالیز مولکولی ژن SrRNA16نشان داد که تعداد 40 باکتری(07/74 درصد) از این باکتریها متعلق به شاخه اکتینوباکتریا هستند. نتایج سنجش آنالیز مولکولی انجام گرفته روی ژنهای NRPS، PKSIو PKSII نشان داد که از 40 جدایه اکتینوباکتریا جداسازی شده، 28 جدایه(70 درصد) دارای ژن NRPS، 8 جدایه(20درصد) دارای ژن PKSI و 22 جدایه(55 درصد) واجد PKSII بودند. برای تعیین حساسیت ضد میکروبی اکتینوباکتریاهای جدا شده از روش انتشار چاهک اگار استفاده گردید و نتایج نشان داد از 40 باکتری جداشده، 6 جدایه(15 درصد) دارای خاصیت ضدباکتریایی بر علیه باکتریهای بیماریزا بودند. نتایج پژوهش انجام شده نشان می دهد که که گیاه دارویی پونه دارای تعدادی از اکتینوباکتریای فعال با خاصیت آنتی بیوتیکی است. و گیاه پونه میتواند منبع خوبی برای به دست آوردن اکتینوباکتریای تولید کننده آنتی بیوتیک باشد.
|