1405/02/21

محمد رضا عالی منش

مرتبه علمی: استادیار
ارکید:
تحصیلات: دکترای تخصصی
ریسرچ گیت:
دانشکده: کشاورزی
اسکولار:
پست الکترونیکی: alymanesh [at] gmail.com
اسکاپوس:
تلفن:
HIndex:

مشخصات پژوهش

عنوان
غربالگری باکتریهای لاکتیک اسید محرک رشد با ویژگی‌ مهار زیستی علیه Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum و Pythium aphanidermatum
نوع پژوهش
پایان نامه
کلیدواژه‌ها
پوسیدگی نرم، مرگ گیاهچه، باکتری LAB، کشت متقابل، کلروفرم
سال 1403
پژوهشگران منا جعفری(دانشجو)، محمد رضا عالی منش(استاد راهنما)

چکیده

امروزه به دلیل مخاطرات استفاده از سموم شیمیایی، استفاده از روشهای ایمن برای کنترل بیماریهای گیاهی از جمله بکارگیری باکتریهای اندوفیت و ریزوسفر که به صورت مستقیم و یا غیرمستقیم رشد گیاهان را بهبود میبخشند و عوامل بیماریزای گیاهی را محدود و یا سرکوب مینمایند، ضروری میباشد. بیمارگر باکتریایی Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum و بیمارگر قارچی Pythium aphanidermatum به ترتیب دو بیمارگر مهم در مرحله انبارداری و در مزارع سبزی و صیفی هستند که به ترتیب باعث ایجاد بیماری پوسیدگی نرم و بیماری بوته میری میشوند. باکتری‌های لاکتیک اسید (LAB) بعنوان یک گروه مهم از موجودات پروبیوتیک دارای کاربرد چندگانه بوده و در ارتقای ایمنی مواد غذایی، بهبود سلامت خاک و افزایش رشد گیاه نقش دارند. این باکتریها به طور مستقیم با افزایش جذب مواد غذایی و تولید بعضی هورمونهای رشد و بهطور غیرمستقیم با کنترل زیستی بیمارگرها و یا القای مقاومت در گیاهان، موجب رشد آنها میشوند. بنابراین، این پژوهش جهت غربالگری باکتریهای LAB و بررسی توان آنتاگونیستی آنها علیه این دو بیمارگر انجام پذیرفت. ابتدا تعداد 49 سویه باکتری اندوفیت و اپیفیت از گیاهان مختلف و در محیط کشت اختصاصی MRS جداسازی شد که گروهی از آنها دارای خصوصیات احتمالی باکتریهای LAB بودند. در مرحله بعد، در شرایط آزمایشگاهی تأثیر سویههای باکتری در مهار بیماری پوسیدگی نرم و بیماری بوتهمیری به ترتیب با روش کلروفرم و روش کشت متقابل بررسی گردید. سپس تاثیر این باکتریها بر جوانهزنی و تحریک رشد بذور تربچه بهعنوان گیاه مدل مورد سنجش قرار گرفت. در ادامه، تاثیرگذاری سویههای مختلف بر کنترل بیماری پوسیدگی نرم با روش پکتیناز روی غده سیب زمینی آزمایش شد. در نهایت، باکتریهایی که هم بر علیه پیتیوم دارای هاله بازدارنده بودند و هم بیشترین کاهش وزن بافت لهیده سیب زمینی ناشی از پکتوباکتریوم در مقایسه با شاهد را نشان دادند و از طرفی بر روی جوانهزنی بذور تربچه تاثیر مثبت داشتند؛ به عنوان جدایه برتر مورد شناسایی با آزمونهای اولیه کلاسیک تشخیص باکتری و آزمون مولکولی تشخیصی (با استفاده از PCR به کمک آغازگرهای 16SrRNA Universal) قرار گرفتند. سپس محصول PCR توالی یابی شد. در آزمون کشت متقابل، سویه ESA2 با ایجاد یک هاله بازدارنده به قطر 21 میلیمتر از میان تمام سویهها، بیشترین بازدارندگی در مقابل پاتوژن پیتیوم را داشت. همچنین این سویه در آزمون پکتیناز با کاهش وزن بافت لهیده سیب زمینی به میزان 82/80 درصد، بیشترین تاثیرگذاری را در مهار پاتوژن پکتوباکتریوم نشان داد. تاثیر مثبت این باکتری بر جوانهزنی بذور تربچه هم به اثبات رسید. در نهایت سویه ESA2 بهعنوان Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides شناسایی شده و برای اولین بار از یک گونه گیاهی جداسازی و بهعنوان محرک رشد گیاهی و عامل ضد قارچی و ضد باکتریایی بر روی دو بیماگر مذکور معرفی گردید.