مصطفی نعمتی

باکتری اشریشیاکلی جزء فلور طبیعی روده انسان، پستانداران و پرندگان می‌باشد. عموماً اشریشیا کلی یک پاتوژن فرصت‌طلب به شمار می‌رود که در پی سرکوب سیستم ایمنی میزبان و وقوع بیماری‌های اولیه ویروسی و میکروبی دستگاه تنفسی به طور ثانویه ایجاد می‌شود. اشریشیا کلی در انسان و پستاندارن غالباً مسئول عفونت‌های گوارشی است، کلی‌باسیلوز در سنین مختلف بروز می‌کند اما عفونت در گوساله‌های جوان‌تر شایع است و بیشتر در سنین زیر3 روز رخ می‌دهد. با توجه به اینکه گونه‌های اشریشیا کلی پاتوژنیک دام‌ها نقش مهمی را در مسمومیت غذایی دارا می‌باشند و تولیدات دامی می‌توانند منبع مناسبی از ETEC باشد که باعث بیماری‌زایی در انسان شود بایستی تدابیری اتخاذ نمود که از ابتلای انسان به این باکتری جلوگیری شود، این بررسی با هدف جداسازی مولکولی ژن‌های1Stx و2Stx و Sta در اشریشیا‌کلی گوساله‌های مبتلا به کلی‌باسیلوز با استفاده از کشت و PCR چندگانه در استان ایلام انجام گرفت. برای انجام این تحقیق 100 جدایه اشریشیا کلی از گوساله مبتلا به کلی‌باسیلوز از گاوداری‌های استان ایلام جمع‌آوری گردید. نمونه‌ها در ظروف استریل در اسرع وقت به آزمایشگاه میکروبیولوژی دانشکده پیرادامپزشکی دانشگاه ایلام منتقل گردید. شناسایی اولیه جدایه‌ها با استفاده از رنگ‌آمیزی گرم و رشد در محیط مک‌‌کانکی صورت گرفت. برای تأیید نهایی جدایه‌های اشریشیا کلی تست‌های بیوشیمیایی تکمیلی انجام گردید. ابتدا جدایه‌ها بر ‌روی‌ ژلوز ‌EMB کشت ‌و‌ به مدت ‌یک ‌شبانه‌ روز ‌در‌ دمای ‌37 درجه‌ سانتی‌گراد‌ انکوبه ‌شدند، سپس ‌از‌ پرگنه‌های ‌لاکتوز ‌مثبت ‌که ‌‌دارای ‌جلای ‌فلزی ‌بودند، جهت ‌تشخیص‌ و‌ تعیین‌ هویت‌ نهایی ‌بر‌ روی ‌محیط‌های SIM MR-VP، TSIو سیمون سیترات و اوره انتقال ‌داده ‌و ‌بعد ‌از ‌تایید‌ بیوشیمیایی‌ جدایه‌های ‌مورد‌ نظر ‌را ‌در ‌محیط‌TSB واجد ‌40 ‌% گلیسرول ‌ذخیره ‌و‌ نگهداری ‌شدند. با توجه به نتایج به دست امده ازتعداد100 جدایه خالص شده و با توجه به انجام آزمایشات مولکولی و آزمایش واکنش زنجیره‌ایی پلیمراز در مجموع (26%) دارای ژن 1Stx، (10%) دارای ژن 2 Stxو (33%) دارای ژن Sta بودند.